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Molekulare Charakterisierung G-Protein gekoppelter Rezeptoren bei Insekten

  Christian Krach
   
Betreuer Dr. Wolfgang Blenau

 

 
Thema
Biogene Amine stellen eine wichtige Gruppe von Liganden für G-Protein gekoppelte Rezeptoren (GPCRs). Diese Rezeptorfamilie weist eine hoch konservierte Struktur von 7 Transmembrandomänen (7TM) auf. Die Amine beeinflussen somit über ihre Rezeptoren unterschiedlichste physiologische Vorgänge z. B. die Regulation des Stoffwechsels, Geruchswahrnehmung und – gedächtnis oder auch Verhaltensmuster.

In der Schabe Periplaneta americana wird die Speichelsekretion nachweislich von Dopamin und Serotonin reguliert.

Ziel meiner Arbeit ist es, aus der Schabe Aminrezeptoren zu klonieren, zu lokalisieren, heterolog zu expremieren und anschließend parmakologisch zu charakterisieren. Dies soll zu einem besseren Verständnis über die Signaltransduktion vom Amin über den Rezeptor bis hin zur Speichelsekretion führen.

 

Die Arbeit soll dabei helfen, die anatomischen/physiologischen Ergebnisse zur aminergen Regulation der Speicheldrüsenfunktion durch molekulare Analysen zu komplettieren.

Bis heute ist nämlich nur ein Rezeptor für Octopamin aus der Schabe kloniert worden.
 

Methoden

 

- Phagen-cDNA-Bank Screens (Hybridisierung, PCR),

-Verschiedene PCR-Techniken (Einsatz von degenerierten Primern, RACE- PCR, RT-PCR),

- In situ-Hybridisierungen,

- Immunohistochemie,

- Heterologe Expression in HEK-Zellen,

- cAMP/Ca2+-Assays

 
Literatur
Blenau,W., Baumann,A. (2003) Aminergic signal transduction in invertebrates: focus on tyramine and octopamine receptors. Recent Res. Devel. Neurochem 6, 225-240.
   
   
   
   
   
   
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Copyright © 2004, Biochemie/Biologie, Universität Potsdam, Jana Schlenstedt & Piotr Kos